因?yàn)樽贤馕諟y試的時候需要測的是光線通過比色皿前后的差別，光是直線的，所以兩面透光就夠了。而熒光測試的需要一束激光照在比色皿上，然后在另外一邊檢測溶液的發(fā)光。
由于光是直線傳播的，所以檢測器不能在激光源的對面放置（如果放在光源的對面，檢測的就是光源的光譜），事實(shí)上檢測器，光源和比色皿之間是90度角的關(guān)系，所以熒光比色皿需要四面全透。
熒光光度計收集的是受激分子發(fā)射的光譜。為了避免激發(fā)光，反射光進(jìn)入檢測器而造成誤差，入射光源和檢測器的方向垂直。
由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍(lán)紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中，激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光，熒光經(jīng)過濾過和反射后，被光電倍增管所接受，然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來。
不同物質(zhì)由于分子結(jié)構(gòu)的不同,其激發(fā)態(tài)能級的分布具有各自不同的特征，這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質(zhì)都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜；，因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來定性地進(jìn)行物質(zhì)的鑒定。
